??????? 1 適用范圍
??????? 本準(zhǔn)則規(guī)定了殺菌、殺蟲劑使用后可能對作物產(chǎn)生藥害風(fēng)險的室內(nèi)試驗及安全性評價的基本原則和方法。適用于評價擬申請登記殺菌、殺蟲劑對作物的直接藥害風(fēng)險,為其登記和合理使用提供科學(xué)依據(jù)。
??????? 2 術(shù)語和定義
??????? 2.1 安全性:殺菌、殺蟲劑在推薦使用劑量范圍內(nèi)及高于推薦劑量一定范圍內(nèi)使用,對處理作物不會造成嚴(yán)重不可逆?zhèn)?,不影響作物產(chǎn)量和品質(zhì)。一般安全性越高,藥害風(fēng)險越低。
??????? 2.2 藥害:殺菌、殺蟲劑使用后對作物產(chǎn)生的可視性傷害。
??????? 2.3 苗前處理:藥劑種子處理(包衣、拌種、浸種等)和播種前后的苗前土壤處理(撒施、澆灌、注射、熏蒸等)。
??????? 2.4 生長期處理:指在作物出苗以后至收獲之前的藥劑處理。其中在出苗以后至孕穗或花蕾形成之前的藥劑處理,稱為營養(yǎng)生長期處理;在孕穗或花蕾形成后的處理稱為生殖生長期處理。
??????? 2.5 采后處理:指在采收以后對作物的果實(或種子等)進(jìn)行的藥劑處理。
??????? 3 基本原則與要求
??????? 3.1 試驗藥劑
??????? 3.1.1藥劑。試驗藥劑采用與擬申請登記藥劑組分或配方一致的樣品,
??????? 即配方及加工工藝相同的制劑。注明通用名、含量和劑型。
??????? 3.1.2劑量設(shè)臵。殺菌、殺蟲劑對作物安全性室內(nèi)試驗中,試驗藥劑的劑量以生產(chǎn)企業(yè)推薦的田間藥效試驗最高劑量為最低試驗劑量,按1倍、2倍、4倍劑量的梯度設(shè)計試驗處理劑量,并設(shè)不含藥處理的對照。
??????? 3.2 供試作物
??????? 3.2.1適用靶標(biāo)作物。本準(zhǔn)則主要適用于殺菌、殺蟲劑對糧食作物、瓜菜類作物、經(jīng)濟(jì)作物等作物的室內(nèi)安全性評價,及對果樹類種苗或組培苗的安全性評價。
??????? 殺菌、殺蟲劑對果樹成株生長期的安全性評價及其他特殊作物的安全性評價,可以參考本準(zhǔn)則有關(guān)規(guī)定在田間進(jìn)行試驗。
??????? 3.2.2供試作物的品種。由于不同品種或生物類型的作物對殺菌、殺蟲劑的敏感性存在很大差異,殺菌、殺蟲劑對作物安全性試驗,須選用擬申請登記作物的3個以上不同常規(guī)品種(如:水稻的粳稻、秈稻、糯稻,白皮小麥和紅皮小麥等)作為供試作物。
??????? 3.2.3 供試作物的栽培。用于評價殺菌、殺蟲劑安全性的每個作物品種,種質(zhì)或生長勢需要一致。選用干凈飽滿的種子,采用營養(yǎng)一致的土壤在氣候條件可控的培養(yǎng)箱或溫室內(nèi)培養(yǎng),保持良好的水肥管理。
??????? 4 試驗方法
??????? 根據(jù)生產(chǎn)企業(yè)推薦的田間藥效試驗施藥時期和施藥方法選擇。
??????? 4.1 苗前處理
??????? 4.1.1儀器設(shè)備。人工氣候培養(yǎng)箱或光照培養(yǎng)箱或人工氣候室、電子
??????? 天平(精確度到0.1mg)、移液器、培養(yǎng)皿、種子或土壤處理的容器、直徑150~200mm的盆缽等
??????? 4.1.2試材。種子:種質(zhì)一致,去除空癟粒,沖洗干凈并晾干,對照發(fā)芽率應(yīng)在90%以上。
??????? 土壤:試驗用土壤經(jīng)風(fēng)干過篩,裝入金屬容器,烘箱中65℃下烘8小時,晾涼后備用。
??????? 4.1.3 藥劑處理。選用種質(zhì)一致的3個品種的供試作物種子。按照擬申請登記的施藥方法(種子處理或土壤處理)設(shè)計劑量和進(jìn)行藥劑處理,藥劑處理時保證均勻一致。其中以浸種方法處理種子的藥劑,應(yīng)該具有水溶性,避免兌水稀釋后沉淀或析出而處理不均勻。
??????? 浸種法:將種子浸泡在藥液中,浸泡時間與生產(chǎn)常規(guī)一致。處理后撈出直接或經(jīng)清洗后晾干,編號備用。
??????? 拌種和種子包衣法:按推薦方法將藥劑與少量細(xì)土或少量水稀釋后,在適當(dāng)大小的容器內(nèi)按無藥對照和從低劑量至高劑量順序?qū)⒎N子和藥劑攪拌均勻,晾干后編號備用。
??????? 土壤處理:按推薦土壤處理的使用方法和劑量進(jìn)行藥劑土壤處理。如按處理劑量將藥劑與土壤混合制成毒土備用。將無藥的營養(yǎng)土裝盆缽4/5,播種后撒藥土覆蓋10mm,或撒藥土10mm厚后播種,再覆蓋無藥或含藥土壤。
??????? 經(jīng)種子或土壤處理播種后,每天噴水保持土壤濕潤,利于種子發(fā)芽出苗。
??????? 4.1.4藥劑對作物發(fā)芽或出苗的安全性試驗方法
??????? 首先通過發(fā)芽試驗檢測藥劑對作物種子發(fā)芽的安全性,如檢測結(jié)果為嚴(yán)重抑制發(fā)芽,則不需再做出苗試驗;如發(fā)芽試驗無明顯抑制,則需通過出苗試驗進(jìn)一步驗證藥劑對作物的安全性。
??????? A:發(fā)芽試驗:將各藥劑處理的100粒種子,放臵于培養(yǎng)皿內(nèi)保持濕潤的濾紙上,根據(jù)不同作物種子的特性,放臵于適宜條件下培養(yǎng),逐日觀察發(fā)芽情況。記錄并計算對照發(fā)芽50%、對照完全發(fā)芽及對照完全發(fā)芽3~5天后的各處理發(fā)芽率及根長和根數(shù)。
??????? 種子發(fā)芽的標(biāo)準(zhǔn):
??????? (1)禾谷類作物種子,正常發(fā)育主根長度超過種子長度,幼芽長度超過種子長度1/2。
??????? (2)園粒種子幼根和幼芽長度超過種子直徑。
??????? (3)小粒豆類植物種子有正常幼根,并有一個幼根與子葉相連。
??????? (4)林木種子的幼根正常,并長于種子長度1/2,小粒種子幼根長度超過種子長度的,均定為發(fā)芽。
??????? B:出苗試驗:將營養(yǎng)一致的土壤裝于盆缽內(nèi),孔隙度相似,土壤含水量大約60%。將各處理的100粒種子分別播種于盆缽內(nèi)平整的土壤表面,再覆土3~10mm(因種質(zhì)而異),25℃光照培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng),于出苗后7、14、21天定期觀察記錄出苗情況。記載作物的生長狀況和描述藥害癥狀,檢查和計算不同處理間的出苗率、出苗勢(整齊度以株高標(biāo)準(zhǔn)差表示)、苗高、根長、根數(shù)、鮮重、干重、根莖重量和長度比。
??????? 4.2生長期處理
??????? 4.2.1 儀器設(shè)備。人工氣候培養(yǎng)箱、人工氣候室或可控日光溫室(光照、溫度、濕度),可控定量噴霧設(shè)備,電子天平(精確度0.1mg),移液器等。
??????? 4.2.2試材。生長一致的同一種作物3個品種。
??????? 4.2.3藥劑處理
??????? 4.2.3.1土壤處理。包括顆粒劑撒施、毒土撒施、澆灌、土壤注射等。按藥劑各處理劑量將顆粒劑均勻撒施,或按劑量將藥劑與225公斤/公頃細(xì)土混合后撒施于作物根圍,或與水稀釋后均勻澆灌或灌注于作物根圍。