一、開機操作規(guī)程
1. 開機
按Power鍵,按以下順序依次開啟HPLC系統(tǒng)各設(shè)備的電源:總電源→泵→柱溫箱
2. 脫氣
將吸濾頭分別放入流動相中,旋轉(zhuǎn)排液閥至180度,啟動鍵板上的Purge鍵,排液1~2min;再按一次Purge鍵停止沖洗操作,關(guān)緊排液閥。
3. 設(shè)定參數(shù)
按Func鍵依次設(shè)定儀器參數(shù):流速(或壓力)、壓力最大限、壓力最小限。當屏幕顯示區(qū)閃爍時,提示可以輸入數(shù)值,按Enter鍵確認。在A泵面板上,按Conc鍵,根據(jù)流動相比例,設(shè)置B泵比例。
4. 啟動流速
先按CE鍵顯示初始屏幕,然后按一下Func鍵,屏幕顯示區(qū)閃爍,提示可以輸入數(shù)值,按Enter鍵確認。以0.2ml/min的梯度逐步升至所需流速(一般為1.0ml/min)。按Enter鍵之前,按CE鍵可以刪除新設(shè)定的數(shù)值。
5. 準備進樣
平衡10min后,開啟檢測器、計算機以及信號收集器。待基線平衡后(約15~30min),進樣,即可進行等度洗脫。
6. 梯度洗脫
先按照上述方法,設(shè)定好0時刻流動相比例,然后按edit鍵編輯梯度程序,然后按Enter鍵,按照規(guī)定流程進行設(shè)定。
6.1 如有要刪除的程序步驟,就按Enter鍵查找需要刪除的程序,然后按del鍵即可。
6.2切記:最后設(shè)定好程序,按CE鍵返回原始狀態(tài),升至需要流速,等基線平衡后(約15~30min),進樣,立即按run鍵,啟動梯度程序。
7. 清洗
首先關(guān)閉檢測器,然后按照參數(shù)方法,降低流速,換用流動相,具體內(nèi)容見注意事項。
8. 關(guān)閉HPLC系統(tǒng)各設(shè)備所有電源,且傾倒廢液。
二、注意事項
1. 特別注意:一定打開排液閥,再按Purge鍵,否則很容易把色譜柱沖塌陷。
2. 如果流動相中含有酸,用10%的甲醇(乙腈)水溶液沖洗系統(tǒng)40~60min,然后再用100%甲醇沖洗系統(tǒng)10min,保證所有管路都在100%甲醇溶液中。
3. 如果流動相中含有離子對或緩沖鹽,用10%的甲醇(乙腈)水溶液沖洗系統(tǒng)60~90min,然后再用100%甲醇沖洗系統(tǒng)10min,保證所有管路都在100%甲醇溶液中。
4. 如果管路長時間不用,請用100%甲醇把管路沖洗干凈,以免管路發(fā)霉、長菌、腐敗。
5. 經(jīng)常將2個管路相互使用不同的流動相。
6. 特別注意:在做樣品制備時,一定記住要將檢測器中,入口的阻尼管更換為 二通。
7.如果儀器可以連續(xù)使用,不必關(guān)機,如果超過4h以上,就可以考慮關(guān)機,節(jié)約氘燈壽命。